Isso pode ser feito diretamente através do Glade.
Crie e selecione sua barra de ferramentas. À direita, selecione a guia common e adicione a linha inline-toolbar às Classes de estilo .
Note que você não verá nada diferente no próprio editor, mas apenas quando executar o aplicativo ou através do visualizador integrado.
Se você criar sua interface manualmente, precisará definir a classe de estilo manualmente assim:
# You take care of getting the toolbar ofcourse
context = toolbar.get_style_context()
context.add_class(Gtk.STYLE_CLASS_INLINE_TOOLBAR)
Mais classes de estilo podem ser encontradas na documentação .