Você deve inicializar a versão relevante do MS-DOS (eu sei, frango e ovo ... eu vou chegar a isso em um minuto) e usar
SYS A:
para colocar os arquivos de inicialização necessários no lugar certo. Isso está assumindo que o disco já está formatado. Alternativamente, poderia usar o FORMATO A: / S
Dito isto, muitas vezes há outra maneira de fazer isso funcionar. (Eu fiz um pouco de pesquisa sobre isso anos atrás, quando eu considerei escrever um programa SYS multi-versão. Mas eu não fiz isso, e o que eu lembro agora pode ser bastante antigo ...) Muitas vezes, o truque era apenas pegar IO .SYS na primeira parte do disco, e MS-DOS.SYS pode ser necessário para ser o próximo arquivo no disco. Os detalhes precisos variavam em diferentes versões do MS-DOS.
O uso de disquetes pode ser mais fácil do que os discos rígidos, já que os discos rígidos tinham MBRs para trabalhar. Mas eu acho que esta versão antiga do MS-DOS realmente não suporta discos rígidos de qualquer maneira, então definitivamente planejo usar disquetes. (Ou, já que você disse que está usando o VirtualBox, imagens de disquetes).
Eu suspeito que o uso de SETVER e a execução do SYS do MS-DOS 1.0 a partir de uma versão mais recente do DOS possa ser útil (se você for bastante aventureiro para continuar experimentando ideias que podem não funcionar).
Você pode especificamente desejar procurar informações relacionadas à funcionalidade "boot loader" do sistema operacional.