O que mudou desde o começo da semana? Sua equipe consiste em programadores desenvolvendo ativamente o site que você está hospedando?
Você concedeu permissão de leitura IUSRS ou já estava lá? Você reiniciou o IIS depois de adicioná-lo?
Você pode tentar executar a ferramenta Monitor de processo , reproduzir o erro e procurar por "Acesso Negado ”na coluna“ Resultado ”. Você pode então configurar as permissões necessárias de acordo.
O usuário do pool de aplicativos também possui acesso de leitura a C: \ RivWorks \ dev? Você pode querer substituir as permissões em todos os objetos-filhos dentro do RivWorks \ dev após a verificação (Propriedades da pasta, Guia Segurança, Avançado)