Na minha experiência, não. O sistema entrará em pânico quando o dispositivo raiz desaparecer. Você pode verificar isso em sua situação particular se quiser usar um aplicativo de virtualização como o VirtualBox, o qemu, o kvm, etc. Esses recursos permitirão remover um HDD virtual da máquina e observar o resultado no sistema.
Se você estiver interessado em criar uma unidade USB inicializável que carregue na RAM e execute a partir daí, confira o Knoppix e suas variantes e clones ou qualquer uma das distribuições do Live Linux. Uma vez que inicializa, o meio de origem pode ser removido. Sua finalidade original era ter um sistema totalmente funcional em CD / DVD, mas também funciona bem com o USB.