O Firewall do Windows (ou outro firewall baseado em software, se você tiver um) pode estar bloqueando a resposta de ping em sua segunda NIC. Para fins de teste, desative o firewall. Se isso resolver o problema, você pode adicionar uma regra apropriada para permitir respostas de ping da segunda interface.
Eu também desencorajaria manualmente a criação de uma rota estática para a sub-rede da segunda interface. O Windows sabe que a sub-rede só pode ser acessada por essa NIC devido à combinação de endereço IP / máscara de sub-rede especificada na NIC 2. A única razão pela qual você precisaria especificar manualmente uma rota para a NIC2 é adicional redes de sub-redes só podem ser acessadas por meio dessa interface, em cujo caso haveria um roteador em algum lugar na rede da NIC 2 também.
IMHO, fazer algo manualmente que já é feito automaticamente é adicionar outra variável para complicar o problema que você está solucionando problemas hoje, ou pior, configurar desnecessariamente um problema futuro.